二代测序技术横空出世以来，高通量、低成本的特点使其迅速在生物、医学等领域掀起了一场新的技术革命。

知名生物公司Takara通过不遗余力的探索，倾力推出核心技术——SMART技术，并将二代测序作为重要的应用领域，不断开拓了包括单细胞RNA-Seq、皮克级总 RNA-Seq、表观遗传学、免疫组学等研究的应用，全力打造NGS文库构建的“江湖地位”！

但二代测序虽如猛虎，也有软肋。受限于测序数据读长短，二代测序转录本组装过程可能会存在较多的嵌合体，限制了在可变剪切方面的研究应用；同时由于不能准确获得完整转录本信息，存在错误拼接等问题。正是存在上述的痛点，越来越多的研究人员转向第三代测序技术，例如行业黑马--PacBio公司的单分子实时测序技术。三代全长转录组测序，即采用PacBio测序平台对某一物种的转录组进行测序分析，超长的读长，直接获得完整转录本，无需拼接，弥补了二代转录组测序的缺陷！

在RNA反转录成cDNA的过程中，通过SMART技术的重要解决方案之一SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit就可以准确、灵敏、快速实现。它不仅在二代测序有非常耀眼的表现，在三代测序扮演的角色同样不同凡响！作为PacBio官方认证的cDNA合成试剂盒，SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit为cDNA合成这一步骤提供有力的保障、有效的确保三代全长转录组研究的顺利进行！

SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit值不值得您种草，看小编划好的重点，相信好的“武器”，可以助您驰骋科研道路！

重点一：构建全长cDNA！

由于cDNA合成容易受到模板RNA二级结构的影响，传统方法合成的cDNA，基因5'端通常未能全部存在保留。使用SMART技术结合长距离PCR合成扩增的cDNA，是被富集的全长cDNA。

重点二：无需接头连接！

与传统的方法如adaptor连接方法相比，SMART技术优势之一RNA模板5'末端的转换机制，该技术在cDNA第一链合成的过程中，巧妙且高效地将一段已知序列加入到合成的cDNA两端，不需要adaptor连接，效率更高。

重点三：降低降解风险！

整个SMART流程在一个tube中的单酶反应，有效降低潜在的降解风险！

重点四：多个应用方向！

人类相关研究中的RNA

研究案例：从慢性骨髓性白血病人的外周血和骨髓取样,利用SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit结合PacBio测序，获得BCR-ABL1融合基因中突变的克隆分布的完整信息。

参考文献：L Cavelier ，et al. Clonal distribution of BCR-ABL1 mutations and splice isoforms by single-molecule long-read RNA sequencing[J]. Bmc Cancer, 2015

植物相关研究中RNA

研究案例：对玉米不同组织取样利用SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit进行cDNA合成，利用PacBio进行测序，获得全面的全长转录组信息，阐述了玉米基因表达的复杂性。

参考文献：Olson A, et al. Unveiling the complexity of the maize transcriptome by single-molecule long-read sequencing[J]. Nature Communications, 2016

动物相关研究中RNA

研究案例：对红喉蜂鸟的肝脏组织，利用SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit进行cDNA合成，后续进行PacBio测序，首次完成对禽类的特定组织进行全长转录组测序分析，进一步解析红喉蜂鸟的独特的新陈代谢机制。

参考文献：Workman R E, et al. Single molecule, full-length transcript sequencing provides insight into the extreme metabolism of ruby-throated hummingbird Archilochus colubris[J]. BioRxiv, 2017

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