一直以来，细胞分选都是流式分选（FACS）当道。这当然不无道理，这种技术成熟，灵敏度高，精准度高，应用广泛。然而，流式分选仪价格昂贵，操作复杂，也存在着一些缺陷。首先，高压、高速、高电荷经常会引起细胞活性差、得率低的问题；其次，传统分选鞘液和细胞要在外界打开，很难保证无菌，而且不同样本间还有可能发生交叉污染；另外，电荷式分选会产生气溶胶污染，对于感染性的样本会产生生物安全性问题。

德国美天旎（Miltenyi Biotec）公司最新推出的机械式流式分选仪MACSQuant Tyto，采用多种创新的系统，很好地解决了这些问题，将流式分选带入了一个新时代。

与传统的流式分选仪不同，MACSQuant Tyto采用全封闭的无鞘液设计，全部液流系统位于一个样本盒（cartridge）中，样本盒中最关键的部件是一个微芯片控制的阀门，通过阀门的开合控制细胞的分选。该样本盒采用卡槽式的设计，不同的细胞样本可以更换样本盒，这样能避免样本间交叉污染的风险，而且全封闭的设计也保证细胞处于无菌状态。

（图片来自美天旎）

细胞在较小的压力下通过激光的检测区域，检测到目标细胞后微芯片控制的阀门会打开，让目标细胞流入样本收集孔中；非目标细胞经过时，阀门处于闭合状态，细胞进入废液孔中。整个分选过程中，没有高压和电荷的刺激，最大程度保证了细胞的活性；而且没有产生液滴和气溶胶，对分选操作人员没有生物安全性危害。

也许有人质疑，机械式分选速度很慢。其实，近年来随着微芯片技术的发展，微芯片控制的机械阀开合一次仅需几十微秒，已经达到传统分选仪每秒钟上万个细胞的速度。对于MACSQuant Tyto，它每小时能分选多达5000万个细胞，平均每秒达14,000个。

MACSQuant Tyto的操作也很简单，即插即用，只需将样本盒上样到仪器中即可。激光校准也是全自动的，这样就不需要专门的技术人员来操作。仪器特有8色通道，外加侧向散射和2个反向散射通道。

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在早期研究中，人们利用MACSQuant Tyto来分选全血中的CD4+细胞。他们在2 mL全血中加入CD4荧光抗体，孵育，并用8 mL PBS稀释。结果表明，分选前全血中只含有不到0.01%的CD4+细胞，而分选后的CD4+细胞比例超过91%。这个过程实现了接近10,000倍的高效纯化（如下图A和B））。同样，MART-1抗原特异性T细胞也得到了高效的富集（如下图C和D）。

曾几何时，细胞分选仪一直是高大上的产品，让人仰视。然而，最近一些个人型细胞分选仪的出现，让细胞分选不再是少数人的专利，而有望被更多研究人员所享用。（生物通 余亮）