胃癌研究体内外模型综述
【字体: 大 中 小 】 www.yiwulimax.com 时间:2017年1月19日 来源:吉凯基因
摘要:
目前广泛应用的组织病理学分型已逐渐难以适应临床个体化诊疗的需求,对于胃癌的研究已进入分子水平。俗话说“良好的开端是成功的一半”,想做好胃癌的研究,疾病模型和基因操作工具不可或缺。今天就给大家聊一聊胃癌研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。
胃癌具有高度异质性,通过常规病理可以将胃癌进行一定的区分,但目前广泛应用的组织病理学分型已逐渐难以适应临床个体化诊疗的需求,对于胃癌的研究已进入分子水平。俗话说“良好的开端是成功的一半”,想做好胃癌的研究,疾病模型和基因操作工具不可或缺。今天就给大家聊一聊胃癌研究中,体内外模型的选择,以及病毒工具的应用。且听在下慢慢道来。
一、我需要哪种细胞模型?是否易于操作?
大量的组学研究已经证实了胃癌是一种非常复杂的疾病,如果您想要研究某种特殊分群的胃癌,有两个问题一定要注意:1.所用的细胞、动物模型是否符合疾病的特征;2.如何在模型中根据实验需要,对目的基因进行有效的操作。举个栗子,如果想要研究胃癌中某个基因对p53通路的影响,需要选择什么样的细胞呢?
下面帮大家总结了胃癌各种类型的常用细胞系,再也不怕用错细胞啦!
二、细胞实验效果不错,那动物实验怎么做?
胃癌研究中动物实验主要分为三种类型:I自发胃癌模型;II诱导胃癌模型;III 移植胃癌模型。第I种主要是通过构建转基因动物的方式实现,第II种则利用化学诱导剂或幽门螺旋杆菌 (HP)感染诱导胃癌发生,第III种将人类肿瘤组织或细胞直接接种于裸鼠进行研究。因裸鼠培育条件低,无毛,易于动态观察肿瘤的生长状态,且通过接种方式、部位的选择可达到较满意的转移效果,因此目前多选择裸鼠进行人胃癌细胞异体移值。
对于移植瘤模型中的基因操作,较为常见的是慢病毒感染细胞后接种。若是选择病毒直接注射动物/瘤体,所用的病毒需经过特殊纯化处理,确保滴度高,毒性小,不易引起炎症反应。
三、体内外模型选好了,那么我的实验需要使用哪种方法对基因进行操作呢?
由于细胞和动物模型的不同特点,常常导致基因操作的难易程度不一样。慢病毒*是一种非常高效的基因操作工具,不仅在细胞系中具有高效的表现,在做体内实验的时候,也会经常使用,比如原位组织注射研究基因的功能。下面我们就来看一看,如何选择合适的慢病毒载体对基因进行操作吧~
*慢病毒是一种实现高效体外体内细胞感染的工具。慢病毒能够将外源基因整合入宿主细胞的基因组,使其随细胞增殖稳定表达,并且对分裂期和非分裂期的细胞均有较高感染能力,加之其安全性高、毒性低的特点 , 慢病毒已经成为现代细胞生物学研究中一种广泛应用的基因传递工具。
启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同,这些元件也需要相应变化。对于胃癌研究来说,GIF、GIPR、LIPF是常用的组织特异型启动子。下图帮大家梳理了胃癌中常用载体的选择方案,马上定制你的专属载体,进行表型的观察。获得高分SCI、国自然基金,走上人生巅峰,指日可待!
上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年,拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证,月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用5项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。
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