药物研发难，难于上青天，作用机制研究是关键。
大荧幕上钢铁侠和美队在撕逼，抗肿瘤药物的机制研究亦难分高下，各种靶点通路粉墨登场，到底哪家强？
酪氨酸激酶？血管新生？肿瘤细胞周期相关因子？组蛋白去乙酰酶抑制剂？肿瘤微环境？肿瘤干细胞？肿瘤代谢异常？
药物作用机制如何开展研究？
时间定格在2016年，你还在一个一个敲基因吗？

该醒醒啦！这年代不玩点儿高通量，都不好意思出门啊。

吉凯基因的全基因组Cas9文库筛选震撼来袭！
将CRISPR/Cas9载体文库包装成慢病毒
敲除文库包含122411种sgRNA靶点
其中19050种编码基因
1864种microRNA
过表达文库包含70290种SAM-sgRNA靶点
涵盖23430种编码基因转录本

即将火爆的毁灭性明星技术！
一网打尽目标药物的相关信号通路
收获大批耐药/增敏相关基因
抢先占领目的药物的研究制高点
抢发高分文章
基金申请不再愁
精准医疗的好基友
联合用药按图索骥
药效预期检测工具的开发神器

 
钢铁侠、美国队长式的单兵作战时代已经终结，人海战术的复仇者联盟时代降临！
我们的口号是：简单！粗暴！有效！
Cas9文库在手，高分文章我有！

先看Cas9文库应用的第一篇《Science》，2014年张峰用敲除文库对黑色素瘤细胞A375进行了感染，使用维罗非尼（Vemurafenib，一种BRAF抑制剂）进行药物筛选，发现了NF2、CUL3、TADA2B、TADA1等一系列未报道过的新型药物相关基因。至此，维罗非尼的药物机制研究已经被全盘承包，十年的工作，一年搞定。

 
2015年，张峰用同样的套路故技重施，发了一篇《Nature》，最主要区别是：文库由敲除库换成了过表达库。

全基因组Cas9文库筛选的原理并不复杂： 

• 选定目标药物和细胞系
• 将细胞感染Cas9慢病毒文库
• 使每个细胞随机敲除/过表达某一个基因
• 通过药物筛选及二代测序，得到增敏/耐药相关基因列表

全基因组Cas9文库筛选的主要实验操作步骤包括四阶段：

• 预实验——摸索感染条件等
• 文库筛选——高通量筛选耐药/增敏基因
• 基因验证——验证相关基因的功能
• 机制研究——讲故事，提升文章档次！

Cas9文库筛选是药物机制研究神器，但它不仅限于药物研究，一切能影响细胞生存、增殖的刺激因素皆可研究其背后的机制：致病病毒、缺氧、氧化压力、酸碱压力、温度、气压等。只要脑洞开得大，CNS不是梦！